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凱氏一福斯自動定氮儀的性能實(shí)驗

來源: http://www.324232.com  類別:實(shí)用技術(shù)  更新時間:2015-03-27  閱讀

  蛋白質(zhì)是極其復(fù)雜的含氮有機(jī)化合物,是構(gòu)成活細(xì)胞原生質(zhì)的主要成分,是動植物有機(jī)體內(nèi)進(jìn)行生命過程的物質(zhì)基礎(chǔ)。因此谷物中蛋白質(zhì)含量是衡量其品質(zhì)和營養(yǎng)價值的最重要指標(biāo)。

  測定蛋白質(zhì)的方法很多,國際上通常以凱氏定氮儀為主的凱氏定氮法。凱氏定氮法具有很高的準(zhǔn)確度和精確度,但操作手續(xù)較繁,分析速度較慢,不適應(yīng)大批量檢測的需要。丹麥FOSS公司根據(jù)凱氏原理設(shè)計制造的凱氏-福斯自動定氮儀(簡稱自動儀)就是一種自動、快速測定蛋白質(zhì)的儀器。該儀器將凱氏法的步驟全部自動化,即消化、蒸餾、冷卻、稀釋、滴定、結(jié)果計算都按程序控制自動進(jìn)行。

  我們于1984年9月進(jìn)行安裝調(diào)試,在兩年內(nèi)完成了水稻、小麥、豆類等2000余份樣品的蛋白質(zhì)測定。同時我們對福斯自動定氮儀的準(zhǔn)確度、精密度、儀器的穩(wěn)定性以及自動化儀測定與國家標(biāo)準(zhǔn)法測定相比較等項實(shí)驗研究。

  一、福斯自動定氮儀回收率的測定

  回收率的高低是衡量準(zhǔn)確度高低的重要指標(biāo)。回收率一般采用己知含量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重復(fù)測定來獲得。為了進(jìn)一步驗證福斯自動定氮儀的準(zhǔn)確度我們還測定了難消化物質(zhì)的回收率,供試的標(biāo)準(zhǔn)物為A.R級(分析純、硫酸按,制備為低氮標(biāo)準(zhǔn)液I,其蛋白質(zhì)含量為0.5%和高氮標(biāo)準(zhǔn)液I,其蛋白質(zhì)含量為39.7%,難消化物質(zhì)選用C.P級(化學(xué)純)葵酸,含氮量為11.4%.用這三個標(biāo)準(zhǔn)樣品在自動儀上作了多次重復(fù)測定。標(biāo)準(zhǔn)液I、I的回收率分別達(dá)100%和99.7%,就是很難消化的葵酸回收率也達(dá)99.45%.

  二、福斯自動定氮儀的穩(wěn)定性

  儀器分析中,儀器的穩(wěn)定性,實(shí)質(zhì)是指儀器分析結(jié)果的再現(xiàn)性。再現(xiàn)性好說明儀器穩(wěn)定性好,它是儀器分析是否可靠的重要標(biāo)志之一。為了檢驗儀器的穩(wěn)定性,我們用小麥、玉米、水稻樣品進(jìn)行了多次測定,結(jié)果如表1.表1說明不同時間對同一樣品測定結(jié)果,其相對誤差都在允許范圍內(nèi),再現(xiàn)性良好,證明福斯自動定氮儀穩(wěn)定性是好的、是可靠的。

  三、福斯自動定氮儀精密度實(shí)驗

  為了檢查儀器重復(fù)測定的可靠程度,除了用標(biāo)準(zhǔn)試劑硫酸按和葵酸實(shí)驗,對水稻、小麥、玉米等樣品作了多次重復(fù)測定,對重復(fù)測定結(jié)果作了統(tǒng)計分析如表2.結(jié)果說明儀器有很高的精密度,變異系數(shù)均小于1%,顯著性差異測定均不顯著,說明重復(fù)測定是可靠的。

  四、福斯自動定氮儀與國家標(biāo)準(zhǔn)法測定對比檢驗

  用水稻、小麥、玉米、魚粉等多種樣品分別用凱氏-福斯自動定氮儀和國家標(biāo)準(zhǔn)法進(jìn)行測定。福斯自動定氮儀測定的結(jié)果一般略高于標(biāo)準(zhǔn)法測定的結(jié)果(見表3),這與儀器整個系統(tǒng)有較好的密封、使用強(qiáng)催化劑和氧化劑能在短時間內(nèi)完成消化,使氮的損失少,回收率高有關(guān)。但不論蛋白質(zhì)含量高的樣品(如魚粉含蛋白質(zhì)50%以上)或含蛋白質(zhì)低的樣品(如水稻10%左右)兩個方法測定的相對誤差都在1%以下,都在國家標(biāo)準(zhǔn)法測定的誤差范圍之內(nèi)。同一樣品用兩個方法測定結(jié)果之間無顯著性差異,說明福斯自動定氮儀完全可以信賴。

  五、結(jié)語

  1.凱氏-福斯自動定氮儀的回收率、準(zhǔn)確度和精密度都很高,儀器的性能穩(wěn)定可靠,是一個測定氮和蛋白質(zhì)的較理想的自動化分析儀器。

  2.福斯自動定氮儀自動化程度高(除稱樣、加樣用人工,其余全部自動化進(jìn)行)測定效率高,連續(xù)操作每小時可測定20個樣品。而且儀器側(cè)定范圍較寬含氮量在。-r150or蛋白質(zhì)含量在0 ^-9900的樣品均可測定,因而儀器的利用率高。

  3.福斯自動定氮儀有可靠的安全系統(tǒng),小的故障就會使儀器自動停機(jī)不致發(fā)生意外。

  4.福斯自動定氮儀的主要缺點(diǎn)是藥品耗費(fèi)量大,分析測定的成本較高,測定一個樣品需耗95%的HZS0410^-13m135%的HzOzlOrnl;40%的NaOH50ml;指示劑50m1; KZS049克,Hg00.75克。其中催化劑Hg0有毒,對操作人員有害。因此我們正在考慮試用銻催化劑代替汞催化劑。自動儀以液化石油氣作燃料,沒有這種燃料的地方不宜使用該儀器。