飼料中的含氮物總稱為粗蛋白質，它包括純蛋白質和氨化物，飼料中的蛋白質進入家禽體內后，以氨基酸形式被吸收利用，用以保證畜禽體內蛋白質代謝的需要。根據(jù)畜禽不同的生理狀態(tài)和生產能力搭配日糧中合理的蛋白質水平，對于保證畜禽健康生長。提高畜禽生產能力是十分必要的。已頒布的飼料工業(yè)國標中對于不同畜禽在不同生長期日糧中蛋白質的含量都作了明確規(guī)定。為了保證飼料產品中粗蛋白質的含量符合國標要求，快速、準確地測定飼料產品特別是飼料主要原料中蛋白質的含量是十分必要的。由浙江托普儀器有限公司生產的ZDDN-II型定氮儀可在20分鐘內（從稱樣到得出測定結果）完成飼料樣品中蛋白質的快速測定。

　　1 方法及原理

　　1.1方法

　　強堿直接蒸餾法是一從凱氏定氮法基礎上發(fā)展起來的，和凱氏定氮法有較好相關性的快速檢測方法。

　　1.2原理

　　飼料樣品中部分不穩(wěn)態(tài)氮在強堿作用下，經蒸餾可以以氨的形式釋放出來，當加堿量和蒸餾速度恒定時，釋放的氨量和樣品中氮的含量成比例。將所釋放的氨冷卻后由硼酸接收變?yōu)樗呐鹚岚�，用標準酸滴定，以所消耗的標準酸體積用凱氏定氮公式計算出樣品中不穩(wěn)態(tài)氮的含量，用特定的回歸方程確定出飼料粗蛋白的含量。

　　1.3優(yōu)點

　　DD法由于所測的是不穩(wěn)態(tài)氮，因而可以大大地縮短了定氮時間。在ZDDN-II型定氮儀上僅用20分鐘就可以測定出樣品中粗蛋白的含量，比常規(guī)凱氏定氮法快12倍，比在器上進行愷氏定氮快4一6倍。

　　該方法所用儀器設備、試劑和凱氏定氮基本相同，用戶只要根據(jù)我們提供的測定條件，就可在該儀器上實現(xiàn)蛋白質的快速測定。

　　1.4缺點

　　該快速方法測定的樣品中不穩(wěn)態(tài)氮而不是全氮，它的測定結果的準確性完全取決于測定條件及所用儀器精度。在本文中所述的快速方法及條件僅適用于ZDDN-II型定氮儀。

　　2 儀器和試劑

　　2.1儀器

　　ZDDN-II型定氮儀 分析天平：感量0.00019酸滴定管：2.5ml量筒：iooml、25ml燒杯2.2化學試劑40%氫氧化鈉溶液10%氯化鋇溶液2%硼酸溶液混合指示劑，標準酸溶液2.3樣品豬配合飼料（仔豬、育肥豬）：北京農業(yè)大學提供雞配合飼料（生長雞、產蛋雞、肉雞）：國家飼料質檢中心提供豆粕：中國農科院飼料研究所提供中國農科院畜牧研究所提供玉米：中國逐科院畜牧研究所提供菜籽餅：中國逐科院畜牧研究所提供魚粉：國家水產質檢中心提供。

　　3 測定結果精確度

　　ZDDN-II型定氮儀在進行凱氏法測定蛋白質時，有較高的精度；回收率>“寫、相對偏差<1%.因此儀器在進行DD法快速測定時，同樣可以保證測定結果的準確性。我們試驗用凱氏定氮法和快速測定法，對16種同樣玉米樣品，16種同樣魚粉樣品，16種同樣豬料樣品，16種同樣雞料樣品，16種同樣菜籽餅樣品，16種同樣豆粕樣品測定含氮量，相對偏差均在國標法規(guī)定的允許誤差范圍之內。

　　我們還任選每類樣品中一個，復測定五次，所測結果變異系數(shù)均低于1%,實驗結果說明由ZDDN-II型定氮儀進行飼料中粗蛋白的快速測定具有較好的精密度（見附表）。

　　4 影響測定結果準確度和精密度的主要因素

　　快速法是在凱氏法基礎上發(fā)展起來的。它的操作步驟、所用試劑、儀器設備和凱氏法基本相同，由于該方法測定的是樣品中部分不穩(wěn)態(tài)氮，樣品中真實的含氮量是由在規(guī)定條件下所建立的該法和凱氏法的回歸方程y一吸+bx確定，方程中y為樣品的實際含氮量，x為快速法所測的含氮量。方程中的a.b值是在規(guī)定條件下用凱氏法及快速法對大量樣品進行測定，經數(shù)理統(tǒng)計而確定的，它的值取決于y和x值。x值受下列因素影響。

　　4.1樣品類別不同類別的樣品所含的成份差異較大。實驗證明，即使在完全相同的工作條件下，不同類別的樣品具有不同的回歸方程y=a+bx.

　　4.2定氮裝置的蒸汽量（即單位時l可內的蒸餾速度）定氮裝置的蒸汽量決定了單位時間的蒸餾速度，蒸餾速度不同，單位時間內樣品所釋放的氨量也不同，x值也不同，致使a.b值也不相同，由于手工裝置不能保證恒定的蒸餾速度，即使用同一廠家生產的同一型號玻璃器皿，組裝的手工定氮裝置，由于蒸汽發(fā)生器中的水量不能保持恒定，因此蒸汽量也不能恒定，單位時間內蒸餾量也不能恒定。在某一個手工定氮裝置上所確立的回歸方程，也就無法應用于同類的手工定氮裝置。早在五十年代，國外就報導了用快速法測定奶制品中的含氮量，但由于手工定氮裝置本身的局限性，致使該法一直未得到推廣。直至八十年代，瑞典Tecator公司生產了性能較好的1030型定氮儀，才在該儀器上建立了小麥的快速測定程序，才使該法在該公司生產的1030型儀器上得到推廣應用。

　　4.3蒸餾量快速法的測定結果和餾出液體積有關，樣品所釋放的氨量隨餾出液體積增加而增大。實驗證明，當其它測定條件一定時，餾出液體積變化大于5一loml,測定結果將變化1.2%一3%.手工定氮裝置及部分半自動定氮裝置，其餾出液的體積是靠操作人員掌握，接收瓶本身的刻度誤差，操作人員的目視誤差均可大于sml,因此用這些裝置在應用快速測定方法時難以保證測定結果的準確性和重現(xiàn)性。

　　4.4加堿量及堿液濃度參加反應的氫氧化鈉濃度影響到所釋放的氨量。增多加堿量，將影響測定速度，同時也造成試劑的浪費；加堿量太少，影響測定結果準確度。根據(jù)定氮裝置的工作條件，確定出合理的加堿量是十分重要的。隆達科技公司生產的ZDDN-II型定氮儀選擇的堿量為：40%的氫氧化鈉溶液6Oml.在這個加堿濃度下加堿量誤差不大于士sml,不影響測定結果。

　　4.5樣品的稱樣量樣品量不同，所含的不穩(wěn)態(tài)氮也不同，因此稱樣量應是一個固定值。

　　對于ZDDN-II型定氮儀：雞、豬配合飼料的稱樣量為3. OOOg-3. 040g之間；魚粉、豆粕、菜籽餅的稱樣量為2. 00鮑-2. 02鮑之間；玉米的稱樣量為5. OOOg-5. 080g之間，綜上所述，要保證測定結果的準確性，在稱樣量、加堿量一定的前提下，要保證建立方程所用的定氮裝置和實沒樣品所用的定氮裝置有著相同的且恒定的蒸餾速度和餾出液體積。

　　5  ZDDN-II型定氮儀的特點保證了快速法測定的準確性和重現(xiàn)性

　　由托普儀器公司生產的ZDDN-II型定氮儀，由于在儀器設計和組裝調試上采用了特定方法，因此具有下列較突出優(yōu)點：、s. i蒸餾速度恒定由于該義器有一套獨特的自動蒸餾裝置，它的蒸汽發(fā)生器中的水量始終保持恒定，當外加電源電壓變化為士io%時，每分鐘蒸餾量的變化不大于o. sml,所有由隆達科技公司生產的該類儀器，在出廠前，蒸餾量均調試在一固定值，因此應用由隆達科技公司所提供的快速測定程序及回歸方程可在該公司生產的所有BS- I型定氮儀上應用，實驗證明，具有較好的準確性。

　　5. 2可保證在6分鐘內餾出液體積誤差<5m1由于BS - B型定氮儀具有恒定蒸餾速度，在該儀器上又設置了定時精度為0. 1秒的數(shù)顯時間繼電器，當蒸餾時間確定后，餾出液的體積一單位時間的蒸餾量x蒸餾時間。因此，儀器本身就保證了餾出液體積的恒定，避免了操作人員的目視誤差及接收瓶的該度誤差所引起的餾出液體積誤差，保證了測定結果的準確性和重現(xiàn)性。

　　綜上所述，ZDDN-II型定氮儀在凱氏法定氮時具有較高的精確度，在用快速法定氮時同樣具有較好的精確度，應用該儀器快速測定飼料中粗蛋白的含量，不僅簡單、快速、準確而且和同類儀器相比還具有節(jié)電，對環(huán)境污染少等優(yōu)點，它可對飼料原料及產品進行及時測定，使飼料產品質量得到及時控制。