飼料中脂肪含量測(cè)定的幾個(gè)建議

　　脂肪是飼料及其原料中僅次于蛋白質(zhì)的主要品質(zhì)項(xiàng)目，目前其含量的測(cè)定普遍使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433 - 1994,采用索氏（Soxhlet）抽提原理，影響檢測(cè)結(jié)果的主要因素有樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時(shí)間、大平和烘箱的準(zhǔn)確度、抽提裝置的性能、環(huán)境溫度、所用器具清潔度、樣品中水分含量水平、操作人員水平等。筆者在日常檢測(cè)的具體操作過(guò)程，有時(shí)遇到檢測(cè)結(jié)果受某些因素影響而不穩(wěn)定的現(xiàn)象。為探討出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因，我們就樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時(shí)間這3個(gè)主要影響因素對(duì)魚(yú)粉、豆粕、大豆粉分別進(jìn)行分析探討和調(diào)控試驗(yàn)。

　　1 材料和方法

　　1.1樣品的采集和制備

　　隨機(jī)選用經(jīng)廣州黃埔港入境的魚(yú)粉、豆粕、大豆粉。樣品的抽取和制備按SN/T 0800.1- 1999《進(jìn)出口糧油、飼料檢驗(yàn)抽樣和制樣方法》進(jìn)行。

　　1.2主要儀器與試劑

　　磨樣機(jī)，KNIFETEC 1095型；標(biāo)準(zhǔn)篩，BS 410/1986;脂肪測(cè)定儀；烘箱，東方B型；粗大平，PB5001,感量O.lg;分析大平，AE163,感量O.OOOlg;所需試劑主要是分析純乙醚和沸點(diǎn)范圍3060 0C的石油醚（ 30#） o1.3試驗(yàn)方法根據(jù)日常檢驗(yàn)工作遇到的實(shí)際問(wèn)題，就不同樣品顆粒、不同抽提溶劑、不同抽提時(shí)間，參照現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》中的儀器法進(jìn)行脂肪含量測(cè)定。

　　1.4評(píng)判依據(jù)

　　按現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》中對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果限差的規(guī)定來(lái)評(píng)價(jià)測(cè)定結(jié)果數(shù)據(jù)的有效性。該國(guó)標(biāo)規(guī)定：當(dāng)脂肪含量大于或等于10%時(shí)，允許相對(duì)偏差為3%;當(dāng)脂肪含量小于10%時(shí)，允許相對(duì)偏差為5%01.5主要計(jì)算公式1.5.1月旨肪含量脂肪含量（%）=（抽提后鋁杯恒重一抽提前鋁杯恒重）/風(fēng)干試樣重量X1001.5.2相對(duì)偏差相對(duì)偏差=（測(cè)量值一平均值）/平均值X100%

　　2 結(jié)果和分析

　　2.1不同樣品顆粒大小對(duì)飼料脂肪抽提效果的影響

    在現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》中，脂肪成分的提取主要是通過(guò)將樣品浸泡在抽提溶劑中由抽提溶劑洗滌樣品來(lái)實(shí)現(xiàn)的。樣品顆粒的大小直接影響到樣品能和抽提溶劑接觸的廣度和深度，這將直接影響到所測(cè)樣品脂肪成分的提�。ㄝ腿。┬�率。通常在相同的試驗(yàn)條件卜，樣品顆粒越小，脂肪成分的提�。ㄝ腿。┬�率越高，所測(cè)得樣品的脂肪含量也會(huì)高一些。在日常檢驗(yàn)工作中，有時(shí)懷疑因樣品研磨不夠細(xì)致而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏低。木文以現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994規(guī)定的0.45 mm（40目）顆粒大小為基礎(chǔ)，隨機(jī)選用魚(yú)粉原樣（即未經(jīng)任何磨制）和經(jīng)日常研磨方式（KNIFETEC 1095型磨樣機(jī)，選2s或Ss模式，運(yùn)轉(zhuǎn)次數(shù)視樣品性狀而定）制備的大豆粉、豆粕樣品作為試驗(yàn)組。對(duì)所有實(shí)驗(yàn)樣品分別用1 mm X18目）， 0.45 mm X40目）， 0.212mm（70目）標(biāo)準(zhǔn)篩篩分檢查樣品顆粒大小的分布情況，詳見(jiàn)表1.對(duì)將作為參照組的樣品，如有0.45~篩上物的增加磨制時(shí)間，直到全部過(guò)0.45~篩。然后，對(duì)所有樣品用乙醚作抽提溶劑。浸泡15min,淋洗45min進(jìn)行脂肪含量檢測(cè)。

　　2.2不同抽提溶劑對(duì)飼料脂肪檢測(cè)結(jié)果的影響

　　現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》中規(guī)定用分析純乙醚作為抽提溶劑。

　　乙醚又名二乙醚，由濃硫酸與乙醇共熱至130140℃時(shí)蒸餾而制得，沸點(diǎn)34.5 0C,相對(duì)密度0.714,易溶于乙醇和氯仿等，是良好的抽提試劑。但乙醚蒸氣和空氣的混合物極易爆炸，爆炸極限為1.85%一36.5%（體積）。另外，用于脂肪抽提實(shí)驗(yàn)后的乙醚，由于含有較多氧化物，其收集、儲(chǔ)存、回收等方而存在安全隱患。因此，我們選用較為安全的石油醚，沸點(diǎn)范圍3060 0C,相對(duì)密度0.630.66.石油醚由大然石油或人造石油經(jīng)分餾而得，主要是戊烷和己烷等低分子量烴類的混合物，也是無(wú)色可燃易揮發(fā)澄清液體，不溶于水，溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑，能溶解油和脂肪，多用做溶劑或化學(xué)試劑。我們參照現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6433-1994中儀器法，分別對(duì)3個(gè)大豆粉、3個(gè)豆粕和3個(gè)魚(yú)粉共9個(gè)樣品分別用乙醚和石油醚作為抽提溶劑進(jìn)行浸泡15min,淋洗45 min的試驗(yàn)。

　　2.3不同浸洗時(shí)間對(duì)飼料脂肪抽提效果的影響

　　由于現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》的原理屬于重量分析法，所測(cè)得樣品脂肪含量的數(shù)值與該樣品在浸提前后兩者的質(zhì)量差值有直接聯(lián)系，相同試驗(yàn)條件卜，隨著浸提時(shí)間的延長(zhǎng)，該樣品在浸提前后兩者的質(zhì)量差值會(huì)增大，所測(cè)得樣品的脂肪含量也會(huì)高一些。在日常檢驗(yàn)實(shí)踐中，我們有時(shí)懷疑因浸洗時(shí)間過(guò)短而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏低，木文以脂肪自動(dòng)測(cè)定儀（2050型）操作說(shuō)明書(shū)推薦的抽提時(shí)間60min其中浸泡15min,淋洗45 min）為基礎(chǔ)，分別增設(shè)浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min,淋洗90min兩種抽提方式，對(duì)日常檢驗(yàn)工作量較大的飼料用大豆粉、魚(yú)粉以乙醚作抽提溶劑進(jìn)行試驗(yàn)。

　　3 結(jié)論和建議

　　木文結(jié)合筆者在日常檢測(cè)的具體操作過(guò)程和檢驗(yàn)工作實(shí)踐中，遇到檢測(cè)結(jié)果受某些因素影響而有結(jié)果出入的現(xiàn)象，以常用飼料原料魚(yú)粉、豆粕、大豆粉做研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)樣品顆粒、抽提溶劑、抽提時(shí)間這3個(gè)影響脂肪含量測(cè)定的主要因素分別進(jìn)行分析探討和調(diào)控試驗(yàn)，初步結(jié)果表明：（1）對(duì)大豆粉、豆粕、魚(yú)粉樣品，顆粒研磨至1.00~以卜。月旨肪抽提效果就可以達(dá)到現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994的規(guī)定；（ 2）用乙醚和與乙醚沸點(diǎn)相近的石油醚作為抽提溶劑來(lái)檢測(cè)大豆粉、豆粕、魚(yú)粉中脂肪含量的效果是一致的；（3）浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min ,淋洗90min與浸泡15min,淋洗45 min的抽提效果，在實(shí)驗(yàn)誤差范圍內(nèi)是一致的。

　　在現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994《飼料粗脂肪測(cè)定方法》中，脂肪成分的提取主要是靠有機(jī)溶劑來(lái)萃取，萃取過(guò)程中，除脂肪外，還有有機(jī)酸、磷脂、脂溶性維生素、色素等也溶到萃取液中，最終留在浸提鋁杯里與脂肪一起恒重，影響試驗(yàn)，所以該國(guó)標(biāo)也說(shuō)明測(cè)定結(jié)果為“粗脂肪”或乙醚提取物。因此筆者建議：

　�。�1）樣品顆粒研磨至1.00~以卜，月旨肪抽提效果就可以達(dá)到現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6433- 1994的規(guī)定；

　�。�2）為消除安全隱患，可選用沸點(diǎn)范圍為3060 0C的石油醚來(lái)代替乙醚作抽提溶劑；

　�。�3）抽提時(shí)間以脂肪自動(dòng)測(cè)定儀操作說(shuō)明書(shū)推薦的60min其中浸泡15min,淋洗45min）為宜。